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淺談奧林巴斯熒光光譜儀各零部件原理及主要作用

 更新時(shí)間:2019-10-28 點(diǎn)擊量:3327
   奧林巴斯熒光光譜儀又稱熒光分光光度計(jì),主要組成部分包括光源、激發(fā)單色器、樣品池、熒光單色器及檢測器等。
  1、光源:早期的熒光分光光度計(jì),配有能發(fā)生很窄汞線的低壓汞燈。使用高壓汞燈,譜線被加寬,而且也存在高強(qiáng)度的連續(xù)帶。然而,一個(gè)完整的激發(fā)光譜的測定需一種能發(fā)射從可見到紫外范圍的較高強(qiáng)度的光輻射的燈。氙弧燈能適于此條件,因此,它是目前在熒光分光光度計(jì)中zui廣泛使用的光源。
  2、單色器:單色器的作用是把光源發(fā)出的連續(xù)光譜分解成單色光,并能準(zhǔn)確方便地“取出”所需要的某一波長的光,它是光譜儀的心臟部分。單色器主要由狹縫、色散元件和透鏡系統(tǒng)組成,其中色散元件是關(guān)鍵部件。色散元件是棱鏡和反射光柵或兩者的組合,它能將連續(xù)光譜色散成為單色光。
   1)光柵單色器
  光柵作為色散元件具有不少*的優(yōu)點(diǎn)。光柵可定義為一系列等寬、等距離的平行狹縫。光柵的色散原理是以光的衍射現(xiàn)象和干涉現(xiàn)象為基礎(chǔ)的。常用的光柵單色器為反射光柵單色器,它又分為平面反射光柵和凹面反射光柵兩種,其中zui常用的是平面反射光柵。光柵單色器的分辨率比棱鏡單色器分辨率高(可達(dá)±0.2nm),而且它可用的波長范圍也比棱鏡單色器寬,且入射光80%的能量在一級(jí)光譜中。近年來,光柵的刻制復(fù)制技術(shù)也在不斷地改進(jìn),其質(zhì)量也在不斷的提高,因而其應(yīng)用日益廣泛。
   2)棱鏡單色器
  棱鏡單色器是利用不同波長的光在棱鏡內(nèi)折射率不同將復(fù)合光色散為單色光的。棱鏡色散作用的大小與棱鏡制作材料及幾何形狀有關(guān)。常用的棱鏡用玻璃或石英制成??梢姺止夤舛扔?jì)可以采用玻,它適用于紫外、可見整個(gè)光譜區(qū)。
   3)狹縫
  狹縫是單色器的重要組成部分,直接影響到分辨率。狹縫寬度越小,單色性越好,但光強(qiáng)度也隨之減少。
  3、檢測器
  主要有硒光電池、光電管和光電倍增管等。目前來說由于熒光的強(qiáng)度較弱,一般以光電倍增管作檢測器。選擇光電倍增管要考慮響應(yīng)波長、靈敏度和噪聲水平等。藍(lán)敏管對(duì)蛋白質(zhì)、核酸的測量適用,而紅敏管則適用于熒光染料檢測。
  4、樣品池
  奧林巴斯熒光光譜儀用的樣品池需用低熒光的材料制成,通常用玻璃和石英材料,形狀以方形和長方形為宜。
 

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